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CEC-加壓毛細管電色譜(毛細管電泳儀)
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CEC-加壓毛細管電色譜(毛細管電泳儀)
加壓毛細管電色譜(pCEC)是近年發(fā)展起來的一種新型微分離分析技術(shù),它整合了毛細管電泳與液相色譜的優(yōu)點,通過在填充有HPLC填料的毛細管電色譜柱兩端施加高壓直流電場,樣品在毛細管色譜柱中的保留行為同時受到電滲流及其在流動相與固定相之間分配系數(shù)的影響,大大提高了樣品分離能力,在雙重分離機制的作用下, pCEC 對于被分離樣品細微之處的分辨能力得到了極大的提高。代表了分析學(xué)界高效微分離的趨勢,尤其適用于復(fù)雜生物及化學(xué)體系的研究。 結(jié)合毛細管柱上檢測技術(shù), pCEC 可與紫外檢測器(UV )、熒光檢測器(FLD)、激光誘導(dǎo)熒光檢測器(LIF)、電化學(xué)檢測器(ECD)及質(zhì)譜(MS)等多種檢測手段聯(lián)用,應(yīng)用領(lǐng)域極為廣泛。
美國通微技術(shù)股份有限公司(Unimicro Technologies, Inc.)是著名的專業(yè)微分離分析的儀器制造商,多年來一直致力于電色譜及多維微分析儀器的研發(fā)、制造及應(yīng)用推廣。作為微分析技術(shù)的*,通微于1999年推出了世界上*的加壓毛細管電色譜儀TriSepTM-2000,2004年,美國通微再度推出第三代功能更強大的毛細管電色譜系統(tǒng)TriSepTM- 2100。該系統(tǒng)是建立在擁有多項技術(shù)的2010型基礎(chǔ)上,配以生產(chǎn)的ElectroPakTM 系統(tǒng)毛細管色譜柱,采用1.5µm超細顆粒填料,柱效更高,峰形更好,峰容量更大。實現(xiàn)了多種檢測模式。尤其與質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)、激光誘導(dǎo)熒光檢測技術(shù),為蛋白質(zhì)組學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、天然藥物等研究領(lǐng)域提供了創(chuàng)新的技術(shù)手段。
穩(wěn)定的納升級二元溶劑梯度輸送系統(tǒng)
pCEC將高壓泵運用于CEC系統(tǒng)中,液體在液壓和電滲流的共同作用下通過毛細管色譜柱。該系統(tǒng)可穩(wěn)定輸送幾百納升級的流量,液壓和電壓可同時或獨立地施加于毛細管色譜柱的兩端,程序可調(diào)。
加壓毛細管電色譜擁有幾項明顯的優(yōu)勢:(1)可有效地抑制分離體系中氣泡的產(chǎn)生;(2)由于采用了壓力流和閥進樣等方法,可方便地實現(xiàn)二元溶劑梯度洗脫,提高了分析方法的靈活性、選擇性和分析速度;(3)采用閥進樣保證了進樣的定量和重復(fù)性;(4)壓力流和進樣閥的存在,使該系統(tǒng)可與樣品處理相聯(lián),實現(xiàn)實時、在線樣品分析;(5)從進樣到分離及多次連續(xù)操作的整個分析過程中,高壓電場不間斷,保證了系統(tǒng)的穩(wěn)定性和分析的重現(xiàn)性。
微流控制系統(tǒng)
微流控制部分由分流閥、反壓閥、溶劑混合閥、定量進樣閥和限流閥等部件組成。分離毛細管色譜柱端維持恒定的柱前壓是體系穩(wěn)定的關(guān)鍵,通過分流閥和反壓閥配合來實現(xiàn)。溶劑由高壓泵以恒流的形式泵出,在分流閥處轉(zhuǎn)為恒壓的形式驅(qū)動,從而與高壓電場的電滲流匹配,實現(xiàn)對色譜柱內(nèi)溶劑和樣品的壓力和電場的同時驅(qū)動。50微升小體積混合閥用以實現(xiàn)二元溶劑的梯度混合,在保證混合效率的同時,抑制了梯度的延時,保證了分析的準確性和重現(xiàn)性。定量進樣閥為定容進樣,用以保證進樣的準確度和精度。限流閥的作用是在分析毛細管色譜柱的出口端保持一定的壓力,從而抑制壓力驟然變化引起的氣泡的形成,保證分析系統(tǒng)的穩(wěn)定性。微流控制部分的連接管路內(nèi)徑與定量進樣閥接口處的孔徑相同,從而在zui大程度上減小了進樣死體積和柱外體積的影響。
納升級高精度定量進樣閥
美國通微技術(shù)股份有限公司與V.I.C.I.聯(lián)合開發(fā)了世界上進樣體積zui小的高精度納升級旋轉(zhuǎn)式定量進樣閥。該閥采用內(nèi)置定量環(huán)的方式,通過刻蝕的方法實現(xiàn)納升級定量環(huán)的加工。采樣環(huán)的出口通道為100微米,并可通過PEEK接頭直接與100微米內(nèi)徑的毛細管色譜柱相聯(lián),極大地抑制了死體積的影響。該進樣閥的精度高,相對標準偏差小于1%,進樣準確度好,相對標準偏差小于2%。該納升級定量進樣閥在5000psi的壓力下仍可正常工作,無任何滲漏現(xiàn)象。
*電動填充毛細管色譜柱
*實現(xiàn)電動填充技術(shù)制備內(nèi)徑為50—320um的毛細管填充色譜柱,已經(jīng)開發(fā)的填充柱有C18柱、C8 柱、硅膠柱、氰基柱、氨基柱、陰陽離子交換柱、手性柱和親和柱等上百種毛細管電色譜柱,內(nèi)徑通常為50um、75um、100um,150 um,填充長度可任意選擇。各種柱子的性能及應(yīng)用表明填充技術(shù)穩(wěn)定可靠、重現(xiàn)性好。
紫外/可見光檢測器和激光誘導(dǎo)熒光檢測器
通微研制開發(fā)了毛細管色譜儀的柱上檢測池,檢測池采用專門設(shè)計的光學(xué)結(jié)構(gòu)和液路結(jié)構(gòu),保證了較高的光學(xué)利用率,同時采用柱上檢測提高了分析效率,對于整機提高靈敏度和柱效具有很好的作用。
通微的TriSepTM-2100激光誘導(dǎo)熒光檢測器通過其*的光學(xué)設(shè)計,檢出限可以達到10-13 mol/l (10-21 mol),是世界上目前為止zui靈敏的商品化的激光誘導(dǎo)熒光檢測器。
高壓電源
高精度的高壓電源采用自行設(shè)計的控制和顯示電路以及微電流測量電路。該電源輸出穩(wěn)定,精度高。輸出范圍寬,0~±30kV,*可滿足毛細管電色譜和毛細管電泳的需要;具有輸出短路保護;低能量殘余;具有可靠的外殼屏蔽性能。
CEC-加壓毛細管電色譜(毛細管電泳儀)
技術(shù)參數(shù):
儀器標準配置 Standard Components
部件名 | 數(shù)量 |
TriSep-2100 激光誘導(dǎo)熒光檢測器 Laser Induced Fluorescence Detector | 1 |
各種毛細管色譜柱 Packed Capillary Column | D |
德國肖特 100ml 溶劑瓶 Solution Bottle | D |
筆記本電腦 Laptop | 1 |
CEC-加壓毛細管電色譜(毛細管電泳儀)
主要特點:
◆ 超高效分離:25萬以上理論塔板數(shù)/米
◆ 超快速分離:30秒鐘完成4種樣品的分離
◆ 超高峰容量:3倍于高效液相色譜的峰容量
◆ 超高精度分離:重現(xiàn)性與液相色譜媲美
相對于液相色譜微升級進樣量,毛細管電色譜的分析量只為納升級,在活體取樣時就體現(xiàn)出了其巨大優(yōu)勢。常規(guī)液相色譜無法分析納升級的樣品,過多的取樣量往往會致死本體。
毛細管電色譜結(jié)合了毛細管電泳和高效液相色譜的動力優(yōu)勢,不單純依靠壓力驅(qū)動色譜柱內(nèi)流動相的流動,還通過在毛細管柱兩端加上電場所產(chǎn)生的電場力驅(qū)動溶劑的流動,大大降低了柱內(nèi)壓力。因此在用毛細管電色譜儀進行分析時,我們可以使用內(nèi)徑細小的毛細管色譜柱,超小粒徑填料(1.5μm或3μm)而不用擔心高反壓,大大提高了理論塔板數(shù)和分離效果。
與傳統(tǒng)高壓液相分析技術(shù)相比,毛細管電色譜更短的分析時間,更細的柱內(nèi)體積和更為快速的分離速度使其比之高壓液相分析儀消耗更少的溶劑量,并由此產(chǎn)生更少的廢液,大大節(jié)約了成本,保護了環(huán)境。